आरएनएआई क्या है? तुम्हें सिर्फ ज्ञान की आवश्यकता है
आरएनए हस्तक्षेप (आरएनएआई), जिसे पोस्ट-ट्रांसक्रिप्शनल जीन साइलेंसिंग (पीटीजीएस) भी कहा जाता है, वह प्रक्रिया है जिसके द्वारा आरएनए अणु डबल-स्ट्रैंडेड आरएनए के जवाब में जीन को शांत करते हैं। आरएनए हस्तक्षेप (आरएनएआई) पोस्ट-ट्रांसक्रिप्शनल स्तर पर विशिष्ट जीन के डाउनरेगुलेशन या साइलेंसिंग का कारण बनता है। यह लक्षित जीन और उसके जैविक कार्य के आधार पर कई प्रभावों को जन्म दे सकता है। यह लेख आरएनएआई, आरएनएआई के विभिन्न प्रकार, इसकी क्रिया के तंत्र और आरएनएआई उपचार विज्ञान पर चर्चा करता है।
आरएनए परिभाषा
आरएनए, राइबोन्यूक्लिक एसिड का संक्षिप्त रूप, एक एकल-फंसे न्यूक्लिक एसिड अणु है जो जीन अभिव्यक्ति और प्रोटीन संश्लेषण में मौलिक भूमिका निभाता है। आरएनए की संरचना में राइबोज चीनी अणुओं और फॉस्फेट समूहों से बनी चीनी-फॉस्फेट रीढ़ होती है। चीनी अणुओं से चार प्रकार के नाइट्रोजनस आधार जुड़े होते हैं: एडेनिन (ए), साइटोसिन (सी), गुआनिन (जी), और यूरैसिल (यू)। आरएनए में, यूरैसिल डीएनए में पाए जाने वाले थाइमिन की जगह लेता है।
आरएनए (राइबोन्यूक्लिक एसिड) संरचना
आरएनए हस्तक्षेप क्या है?
जीन साइलेंसिंग को डीएनए मिथाइलेशन, हिस्टोन संशोधन और आरएनएआई सहित विभिन्न तंत्रों के माध्यम से पूरा किया जा सकता है। आरएनएआई एक जैविक प्रक्रिया है जिसमें आरएनए अणुओं का उपयोग जीन को शांत करने या ख़राब करने के लिए किया जाता है। यह जीन अभिव्यक्ति को रोकने की प्रक्रिया है, आमतौर पर प्रतिलेखन या अनुवाद के स्तर पर। आरएनएआई विभिन्न तरीकों से जीन अभिव्यक्ति को नियंत्रित करता है, जिसमें एमआरएनए का विनाश, प्रोटीन संश्लेषण की रोकथाम और क्रोमैटिन संरचना में परिवर्तन शामिल है।
आरएनएआई पोस्ट ट्रांसक्रिप्शनल जीन साइलेंसिंग के लिए एक तंत्र है जिसे पहली बार 1998 में पौधों में देखा गया था। तब से, यह पौधों और जानवरों दोनों में जैविक प्रक्रियाओं की एक विस्तृत श्रृंखला में भूमिका निभाता पाया गया है। आरएनएआई जीन फ़ंक्शन और रोग रोगजनन का अध्ययन करने वाले शोधकर्ताओं के लिए एक शक्तिशाली उपकरण के रूप में उभरा है।
आरएनएआई का आधार छोटे हस्तक्षेप करने वाले आरएनए (एसआईआरएनए) का उत्पादन है, जो डबल-स्ट्रैंडेड आरएनए अणु हैं जो लक्ष्य एमआरएनए और साइलेंस जीन अभिव्यक्ति में पूरक अनुक्रमों से जुड़ते हैं। siRNAs का उत्पादन प्राकृतिक रूप से या सिंथेटिक ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स के उपयोग से किया जा सकता है।
आरएनएआई मध्यस्थ - आरएनएआई के प्रकार
आरएनए अणुओं के विभिन्न रूप आरएनए हस्तक्षेप (आरएनएआई) में मध्यस्थता करते हैं और जीन अभिव्यक्ति को विनियमित करने में विशिष्ट भूमिका निभाते हैं। इनमें से प्रत्येक आरएनए अणु पोस्ट-ट्रांसक्रिप्शनल स्तर पर जीन अभिव्यक्ति को संशोधित करके आरएनएआई मार्ग में योगदान देता है। वे जीन फ़ंक्शन का अध्ययन करने, चिकित्सीय हस्तक्षेप और जीन विनियमन के जटिल तंत्र की खोज के लिए बहुमुखी उपकरण प्रदान करते हैं।
छोटा हस्तक्षेप करने वाला आरएनए (siRNA)
छोटा हस्तक्षेप करने वाला आरएनए (siRNA) एक डबल-स्ट्रैंडेड आरएनए अणु है जिसकी लंबाई आमतौर पर 20-25 न्यूक्लियोटाइड होती है। इसे डिसर एंजाइम द्वारा लंबे डबल-स्ट्रैंडेड आरएनए के दरार के माध्यम से कृत्रिम रूप से संश्लेषित या उत्पादित किया जाता है। siRNA एक मार्गदर्शक अणु के रूप में कार्य करता है जो लक्ष्य mRNA अणु के पूरक अनुक्रमों के साथ जुड़ता है। यह बंधन आरएनए-प्रेरित साइलेंसिंग कॉम्प्लेक्स (RISC) द्वारा लक्षित एमआरएनए के क्षरण को ट्रिगर करता है, अनुवाद को रोकता है और जीन साइलेंसिंग की ओर ले जाता है।
माइक्रोआरएनए (miRNA)
माइक्रोआरएनए (miRNAs) अंतर्जात, एकल-फंसे हुए आरएनए अणु हैं जो लगभग 21-23 न्यूक्लियोटाइड लंबे होते हैं। उन्हें विशिष्ट जीन से प्रतिलेखित किया जाता है और परिपक्व miRNAs बनाने के लिए एंजाइमों द्वारा संसाधित किया जाता है। miRNAs पोस्ट-ट्रांसक्रिप्शनल जीन विनियमन में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं। वे लक्ष्य mRNA अणुओं के 3' अअनुवादित क्षेत्र (UTR) से जुड़ जाते हैं, जिससे लक्ष्य mRNA का अनुवादात्मक दमन या क्षरण होता है। miRNAs कई जीनों की अभिव्यक्ति को नियंत्रित कर सकते हैं, जो विकास, विभेदन और रोग मार्गों सहित विभिन्न सेलुलर प्रक्रियाओं को प्रभावित कर सकते हैं।
लघु हेयरपिन आरएनए (shRNA)
शॉर्ट हेयरपिन आरएनए (shRNA) एक कृत्रिम आरएनए अणु है जो हेयरपिन लूप की संरचना की नकल करता है। इसे जीन वितरण विधियों के माध्यम से कोशिकाओं में पेश किया जा सकता है या वैक्टर से व्यक्त किया जा सकता है। एक बार कोशिका के अंदर, shRNA को सेलुलर मशीनरी द्वारा छोटे हस्तक्षेप करने वाले RNA (siRNAs) बनाने के लिए संसाधित किया जाता है। ये siRNAs लक्ष्य mRNA के क्षरण का मार्गदर्शन करते हैं, जिससे जीन मौन हो जाता है। shRNA का उपयोग आमतौर पर अनुसंधान अनुप्रयोगों में किया जाता है और यह दीर्घकालिक या स्थिर जीन नॉकडाउन प्रभाव प्रदान कर सकता है।
siRNA बनाम miRNA
जबकि siRNAs और miRNAs दोनों आरएनए हस्तक्षेप (आरएनएआई) के माध्यम से पोस्ट-ट्रांसक्रिप्शनल जीन विनियमन में शामिल हैं, उनकी अलग-अलग विशेषताएं और कार्य हैं।
विशेषता | siRNA | miRNA |
मूल |
बहिर्जात रूप से प्रस्तुत या संश्लेषित |
बहिर्जात रूप से प्रस्तुत या संश्लेषित |
संरचना |
डबल-स्ट्रैंडेड आरएनए अणु |
एकल-फंसे आरएनए अणु |
जीन साइलेंसिंग |
विशिष्ट जीन को शांत करने के लिए डिज़ाइन किया गया |
अधिक सामान्य तरीके से जीन को शांत करता है |
कार्रवाई की प्रणाली |
एमआरएनए से जुड़ता है और अनुवाद को रोकता है |
एमआरएनए से जुड़ जाता है और उसे ख़राब कर देता है |
लक्ष्य विशिष्टता |
कम ऑफ-टारगेट प्रभावों के साथ अधिक विशिष्ट |
अधिक सामान्य प्रभाव और संभावित ऑफ-टारगेट प्रभाव हो सकते हैं |
आरएनए हस्तक्षेप कैसे काम करता है?
आरएनए हस्तक्षेप का तंत्र जटिल है और पूरी तरह से समझा नहीं गया है। हालाँकि, यह ज्ञात है कि छोटे आरएनए आरएनएआई की मध्यस्थता में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं। ऐसा माना जाता है कि छोटे आरएनए लक्ष्य एमआरएनए में पूरक अनुक्रमों से जुड़ते हैं, जिससे एमआरएनए का क्षरण होता है या अनुवाद में बाधा आती है।
आरएनए हस्तक्षेप मार्ग छोटे हस्तक्षेप करने वाले आरएनए (siRNAs) के उत्पादन से शुरू होता है। फिर इन siRNAs को RNA-प्रेरित साइलेंसिंग कॉम्प्लेक्स (RISC) में लोड किया जाता है, जो पूरक mRNA को साफ़ करता है। इसके परिणामस्वरूप एमआरएनए नष्ट हो जाता है या प्रोटीन संश्लेषण रुक जाता है।
आरएनएआई मार्ग का योजनाबद्ध
आरएनएआई संबंधित जीन विनियमन तंत्र
तीन मुख्य तरीके हैं जिनके द्वारा जीन अभिव्यक्ति को जीन अभिव्यक्ति के विभिन्न चरणों में नियंत्रित किया जा सकता है।
Transcriptional RNA interference
ट्रांसक्रिप्शनल आरएनएआई ट्रांसक्रिप्शन के स्तर पर जीन अभिव्यक्ति को शांत करने या डाउनरेगुलेशन को संदर्भित करता है। इसमें आरएनए पोलीमरेज़ का निषेध शामिल है, जो डीएनए को आरएनए में स्थानांतरित करने के लिए जिम्मेदार एंजाइम है। ट्रांसक्रिप्शनल आरएनएआई को कई तंत्रों द्वारा मध्यस्थ किया जा सकता है, जैसे डीएनए मिथाइलेशन, हिस्टोन संशोधन और क्रोमैटिन रीमॉडलिंग। ये प्रक्रियाएँ डीएनए और क्रोमैटिन की संरचना को बदल देती हैं, जिससे जीन प्रतिलेखन का दमन हो जाता है। जीन के प्रमोटर क्षेत्र में ट्रांसक्रिप्शन कारकों और आरएनए पोलीमरेज़ के बंधन को रोककर या बाधा डालकर, ट्रांसक्रिप्शनल आरएनएआई प्रभावी रूप से एमआरएनए अणुओं के उत्पादन को कम कर देता है।
पोस्ट-ट्रांसक्रिप्शनल आरएनए हस्तक्षेप (पीटीआर)
पोस्ट-ट्रांसक्रिप्शनल आरएनएआई डीएनए से एमआरएनए अणुओं के संश्लेषण के बाद होता है और इसमें एमआरएनए स्तर पर जीन अभिव्यक्ति का विनियमन शामिल होता है। यह मुख्य रूप से विशिष्ट एमआरएनए अणुओं के अनुवाद को ख़राब करने या रोकने का कार्य करता है। पोस्ट-ट्रांसक्रिप्शनल आरएनएआई की मध्यस्थता आमतौर पर छोटे आरएनए अणुओं द्वारा की जाती है, जिसमें छोटे हस्तक्षेप करने वाले आरएनए (siRNAs) और माइक्रोआरएनए (miRNAs) शामिल हैं। ये छोटे आरएनए अणु, या तो बहिर्जात रूप से पेश किए गए या अंतर्जात रूप से प्राप्त किए गए, लक्ष्य एमआरएनए अणुओं पर पूरक अनुक्रमों से जुड़ते हैं। इस बंधन से एमआरएनए का क्षरण हो सकता है या प्रोटीन में इसका अनुवाद बाधित हो सकता है, जिससे लक्षित जीन की अभिव्यक्ति प्रभावी रूप से कम हो सकती है।
एपिजेनेटिक आरएनए हस्तक्षेप
एपिजेनेटिक आरएनएआई एपिजेनेटिक निशानों के नियमन के माध्यम से जीन अभिव्यक्ति के मॉड्यूलेशन को संदर्भित करता है, जो जीन गतिविधि में वंशानुगत परिवर्तन होते हैं जिनमें अंतर्निहित डीएनए अनुक्रम में परिवर्तन शामिल नहीं होते हैं। एपिजेनेटिक चिह्नों में डीएनए मिथाइलेशन, हिस्टोन संशोधन और गैर-कोडिंग आरएनए शामिल हैं। गैर-कोडिंग आरएनए, जैसे लंबे गैर-कोडिंग आरएनए (एलएनसीआरएनए), क्रोमैटिन के साथ बातचीत कर सकते हैं और क्रोमैटिन-संशोधित कॉम्प्लेक्स की भर्ती करके या ट्रांसक्रिप्शनल मशीनरी में हस्तक्षेप करके जीन अभिव्यक्ति को प्रभावित कर सकते हैं। एपिजेनेटिक आरएनएआई के परिणामस्वरूप जीन अभिव्यक्ति पैटर्न में दीर्घकालिक और वंशानुगत परिवर्तन हो सकते हैं, जो विकास, सेलुलर भेदभाव और बीमारी में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं।
आरएनएआई हस्तक्षेप प्रौद्योगिकी
आरएनए हस्तक्षेप (आरएनएआई) तकनीक एक शक्तिशाली आनुवंशिक उपकरण है जो जीन अभिव्यक्ति की चयनात्मक और विशिष्ट चुप्पी की अनुमति देता है। यह छोटे आरएनए अणुओं का उपयोग करके जीन गतिविधि को विनियमित करने के लिए आरएनएआई की प्राकृतिक सेलुलर प्रक्रिया का उपयोग करता है। आरएनएआई तकनीक में सिंथेटिक या अंतर्जात छोटे हस्तक्षेप करने वाले आरएनए (एसआईआरएनए) या माइक्रोआरएनए (एमआईआरएनए) अणुओं का परिचय या उत्पादन शामिल है जो विशिष्ट मैसेंजर आरएनए (एमआरएनए) अणुओं को लक्षित करते हैं।
आरएनए हस्तक्षेप तकनीक ने आणविक जीव विज्ञान के क्षेत्र में क्रांति ला दी है और जीन अभिव्यक्ति में हेरफेर के लिए शक्तिशाली उपकरण प्रदान किए हैं। यह जीन फ़ंक्शन का अध्ययन करने, रोग तंत्र को समझने और लक्षित उपचार विकसित करने के लिए एक सटीक और विशिष्ट दृष्टिकोण प्रदान करता है।
संबंधित उत्पाद
संबंधित किट

Human RNASE3/ECP ELISA Kit | |
---|---|
ELISA Type | Sandwich |
Sensitivity | 23.44pg/mL |
Range | 39.06-2500pg/mL |

Human VEGF ELISA Kit | |
---|---|
ELISA Type | Sandwich ELISA, Double Antibody |
Sensitivity | 18.75pg/ml |
Range | 31.25-2000pg/ml |

Human GAPDH ELISA Kit | |
---|---|
ELISA Type | Sandwich ELISA, Double Antibody |
Sensitivity | 0.094ng/ml |
Range | 0.156-10ng/ml |
आरएनएआई अनुप्रयोग
जीन फ़ंक्शन अध्ययन
आरएनएआई का उपयोग बड़े पैमाने पर जीन फ़ंक्शन का अध्ययन करने और सेलुलर प्रक्रियाओं और रोग मार्गों में विशिष्ट जीन की भूमिकाओं को समझने के लिए किया जाता है। लक्ष्य जीन की अभिव्यक्ति को शांत या डाउनरेगुलेट करके, शोधकर्ता परिणामी फेनोटाइपिक परिवर्तनों का निरीक्षण कर सकते हैं और जीन फ़ंक्शन और आणविक तंत्र में अंतर्दृष्टि प्राप्त कर सकते हैं।
रोग में आरएनएआई की भूमिका - आरएनएआई चिकित्सीय
जबकि आरएनएआई जीन फ़ंक्शन का अध्ययन करने के लिए एक शक्तिशाली उपकरण है, इसमें कई प्रकार की बीमारियों के लिए चिकित्सीय रणनीति के रूप में उपयोग करने की भी क्षमता है। आरएनएआई अल्जाइमर रोग, हंटिंगटन रोग और कैंसर सहित कई प्रकार की बीमारियों के लिए एक आशाजनक चिकित्सीय रणनीति है।
आरएनएआई का उपयोग सुरक्षात्मक जीन की अभिव्यक्ति को बढ़ावा देने के लिए किया जा सकता है। उदाहरण के लिए, हंटिंगटन जीन को लक्षित करने वाले siRNAs को मस्तिष्क-व्युत्पन्न न्यूरोट्रॉफिक कारक (BDNF) के स्तर को बढ़ाते हुए दिखाया गया है, एक प्रोटीन जो न्यूरॉन्स को मृत्यु से बचाता है। कैंसर में, आरएनएआई का उपयोग ट्यूमर के विकास को बढ़ावा देने वाले जीन को शांत करने के लिए किया जा सकता है। उदाहरण के लिए, ऑन्कोजीन Bcl-2 को लक्षित करने वाले siRNAs को कैंसर कोशिकाओं में एपोप्टोसिस को प्रेरित करने के लिए दिखाया गया है। आरएनएआई को वायरल संक्रमण के इलाज के रूप में भी खोजा जा रहा है। वायरल एमआरएनए को लक्षित करने वाले siRNAs नए वायरस के संश्लेषण को रोक सकते हैं और शरीर को मौजूदा संक्रमणों को दूर करने में मदद कर सकते हैं।
कार्यात्मक जीनोमिक्स
आरएनएआई जीन फ़ंक्शन की बड़े पैमाने पर जांच और विशिष्ट सेलुलर प्रक्रियाओं या रोग स्थितियों में शामिल नए जीन की पहचान की अनुमति देता है। जीनोम-वाइड आरएनएआई स्क्रीन जीन के व्यवस्थित नॉकडाउन और परिणामी फेनोटाइप के बाद के विश्लेषण को सक्षम करती है, जो जीन नेटवर्क, सिग्नलिंग मार्ग और रोग तंत्र में मूल्यवान अंतर्दृष्टि प्रदान करती है।
फसल सुधार
आरएनएआई तकनीक को कृषि में फसल के गुणों को बढ़ाने के लिए लागू किया गया है, जैसे कि कीट और रोग प्रतिरोध, बेहतर पोषण सामग्री और बढ़ी हुई उपज। कीटों या रोगजनकों में विशिष्ट जीन को लक्षित करके, आरएनएआई का उपयोग पारंपरिक रासायनिक कीटनाशकों के संभावित विकल्प की पेशकश करते हुए, उनके विकास या अस्तित्व को रोकने के लिए किया जा सकता है।
पशु मॉडल
विशिष्ट जीन नॉकडाउन के साथ पशु मॉडल बनाने के लिए आरएनएआई का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है, जिससे शोधकर्ताओं को विकास, रोग की प्रगति और फेनोटाइपिक विशेषताओं पर जीन साइलेंसिंग के प्रभावों का अध्ययन करने की अनुमति मिलती है। यह नियंत्रित और विशिष्ट तरीके से जीन फ़ंक्शन की जांच को सक्षम बनाता है, जिससे विभिन्न जैविक प्रक्रियाओं की हमारी समझ में योगदान होता है।
आरएनएआई बनाम सीआरआईएसपीआर
RNAi और CRISPR दोनों जीन साइलेंसिंग के लिए शक्तिशाली उपकरण हैं। हालाँकि, दोनों के बीच कुछ प्रमुख अंतर हैं।
RNAi | CRISPR |
सभी कोशिकाओं में होने वाली प्राकृतिक प्रक्रिया |
मानव निर्मित प्रौद्योगिकी, बैक्टीरिया में प्राकृतिक तंत्र से अनुकूलित |
प्रतिवर्ती |
अचल |
एक साथ कई जीनों को शांत करने के लिए इसका उपयोग किया जा सकता है |
एक समय में केवल एक ही जीन को लक्षित कर सकता है |
अधिक विशिष्ट |
लक्ष्य से इतर प्रभावों की संभावना अधिक है |
आरएनएआई का भविष्य
वर्तमान में, अधिकांश अध्ययन जीन फ़ंक्शन की पहचान के लिए आरएनएआई को एक उपकरण के रूप में उपयोग करते हैं। ये एकमात्र अनुप्रयोग नहीं हैं जिनके लिए आरएनएआई का उपयोग किया जा सकता है। रोग नियंत्रण (वायरस; जीवाणु रोग; परजीवी; आनुवंशिक ट्यूमर), व्यावसायिक हित के जानवरों का उत्पादन और अनुसंधान उपयोग के लिए पशु मॉडल का उत्पादन कुछ अन्य क्षेत्र हैं जहां आरएनएआई का उपयोग किया जाता है। अन्य संभावित भविष्य के अनुप्रयोगों में शामिल हैं: नशीली दवाओं के सेवन पर नियंत्रण, दर्द से राहत, नींद का नियमन, और कई अन्य।
2014 और 2019 के बीच, वैश्विक आरएनएआई दवा वितरण बाजार में 7% की वृद्धि हुई है और अगले 5-10 वर्षों में इसके बढ़ने की उम्मीद है। कोविड-19 के प्रसार के बाद से आरएनएआई दवा वितरण प्रौद्योगिकियों की मांग भी बढ़ गई है।
Written by Pragna Krishnapur
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